relativní molekulová hmotnost

Anonym Xideheb07.01.2015 08:33 Nahlásit
Navážka 20 mg proteinu A (tvořen 1 podjednotkou) byla rozpuštěna ve 4 ml fosfátového pufru o pH 7,4. Z takto získaného zásobního roztoku bylo odebráno 200 mikrolitrů, přidáno 150 mikrolitrů činidla pro stanovení koncových NH2 skupin a dalších 150 mikrolitrů pufru. V reakční směsi byla zjištěna koncentrace koncových skupin NH2 0,1 mM. Jaká je relativní molekulová hmotnost proteinu A?

c = m/V = 20/4 = 5 mg/ml = 5 g/l
pH = pKa + log c => pak = pH - log c = 6,7

4 ml .........5 g/l
200 mikro ....x
--------------------
x = 250 g/l

Ten už jaksi nevím, jak dál... mohli byste mi prosím poradit?

Odpovědi

Přidat odpověď ▾

Diskuze

Mezek07.01.2015 09:11 Nahlásit
Pokud to dobře chápu, jde o protein, který má v molekule 1 koncovou skupinu NH2. V reakční směsi byla nalezena koncentrace 0,1mmol/dm3. Objem této směsi byl 200 + 150 + 150 = 500*10^-6dm3.
n(NH2) = c*V = 0,1*10^-3*500*10^-6 = 5*10^-8 mol koncových skupin NH2 = 5*10^-8mol prot. A.
Faktor ředění byl 4/0,2 = 20.
n(A, vz.) = 20*5*10^-8 = 10^-6 mol A ve vzorku
M = m/n = 0,02g/10^-6 = 20000g/mol

OK?
Anonym Jibikyf07.01.2015 09:55 Nahlásit
Mohl byste mi prosím objasnit faktor ředění? Nevím, kde vzniklo těch 0,2 kterým dělíte objem... děkuji
Mezek07.01.2015 11:00 Nahlásit
Vzorek byl rozpuštěn ve 4cm3 pufru, z něj bylo ke stanoveníodebráno 200mikrolitrů = 0,2cm3. Poměr vzorek/stanovení je 4cm3/0,2cm3 = 20. Tolikrát je větší látkové množství ve vzorku, než bylo nalezeno ve stanovovaném objemu 200 μl.

Stačí?
Přidat komentář do diskuze ▾