HPLC výpočet - vnější standard
Prosím o radu s tímto výpočtem, vůbec netuším, jak na to.
Látka A byla analyzována pomocí HPLC metodou vnějšího standardu, každý roztok byl nastříkán třikrát. 0,3000 g látky A se rozpustí v 50 ml baňce methanolu R, doplní se po značku. 1ml tohoto roztoku se zředí směsí methanolu R a vody (50:50 v/v) na 25 ml (zkoušky roztok). Stejným způsobem se připraví roztok látky a CRL. Koncentrace standardu byla 222,3 mikro/ml.
A1=190366, A2=191450, A3=188319
A1(CRL)=192603, A2(CRL)=191466, A3(CRL)=191993
(Výsledek má být 220,0 mikrogramu/ ml)
Látka A byla analyzována pomocí HPLC metodou vnějšího standardu, každý roztok byl nastříkán třikrát. 0,3000 g látky A se rozpustí v 50 ml baňce methanolu R, doplní se po značku. 1ml tohoto roztoku se zředí směsí methanolu R a vody (50:50 v/v) na 25 ml (zkoušky roztok). Stejným způsobem se připraví roztok látky a CRL. Koncentrace standardu byla 222,3 mikro/ml.
A1=190366, A2=191450, A3=188319
A1(CRL)=192603, A2(CRL)=191466, A3(CRL)=191993
(Výsledek má být 220,0 mikrogramu/ ml)
Odpovědi
Diskuze
Především: ...Stejným způsobem se připraví roztok látky a CRL...
Takže není nutně se zabývat objemy baněk, objemem vzorku...
A další: 3× nástřik, tzn., že se musí zpracovat (obvykle) průměr signálů z jednotlivých měření.
Pro vzorek to je 190045, pro standard 190020,7
Pro výpočet se vychází s jednoduché rovnice přímky:
S=k·ρ
kde S je signál (odezva detektoru);
k je konstanta úměrnosti;
ρ hmotnostní koncentrace
Zpracováním standardu se dostaneme ke konstantě úměrnosti: k=S(st)/ρ(st)=190020,7/222,3=863,8 mL/μg
A hmotnostní koncentrace vzorku je dána ρ(vz)=S(vz)/k=190045/863,8=220,0 μg/mL