chemie - stanovení molární koncentrace
Stanovuji koncentraci hemoglobinu v krvi. Mám 9 ml krve, k tomu přidám 1 ml EDTA, z toho odeberu 2 ml, zcentrifuguji, supernatant vyliju a pelet rozpustím v 5 ml H2O. Z toho vezmu 1 ml, zcentrifuguji a odeberu 0,5 ml supernatantu a doplním do 5 ml vodou. Z toho vezmu 1 ml a přidám 10 ml činidla (Drabkinův roztok) a měřím na spektrofotometru (540 nm). Naměřenou hodnotu absorbance (0,3) odečtu z kalibrační křivky, kterou mám k dispozici a vyjde mi koncentrace hemoglobinu 0,46 g/L. Můj dotaz (vlastně dva), zní: Jak z těchto dat vypočítám molární koncentraci hemoglobinu v [mol/l] – (Mr hemoglobinu je 68 000)? A jaká je koncentrace hemoglobinu v původním vzorku krve? Když vezmu v úvahu všechna provedená ředění, nemůžu se dostat k žádné smysluplné hodnotě… Předem velké díky za jakoukoli nápovědu…