směšování roztoků
Máte čtyři zásobní roztoky dATP, dGTP, dTTP, dCTP. Všechny mají koncentraci
100mM. Uveďte, jak budete postupovat při přípravě 100 μl směsi, obsahující všechny
4 složky v koncentraci 2 mM.
100mM. Uveďte, jak budete postupovat při přípravě 100 μl směsi, obsahující všechny
4 složky v koncentraci 2 mM.
Odpovědi
Diskuze
požadovaná koncentrace c=2mM=0,002M
požadovaný objem V=100 μl = 100*(1e-6)=100e-6 ℓ = 0,1 mℓ
napíšeme si směšovací rovnici pro 4 složky:
c*V = c1*V1 + c2*V2 + c3*V3 + c4*V4
0,002*100e-6 = 0,1*V1 + 0,1*V2 + 0,1*V3 + 0,1*V4
0,002*100e-6 = 0,1*(V1 + V2 + V3 + V4)
V1 = V2 = V3 = V4 = V0
0,002*100e-6 = 0,1*4*V0
V0 = 0,002*100e-6/(0,1*4) = 0,0000005 ℓ = 0,0005 mℓ = 0,5 μℓ
Postup:
Odměřím od každého z roztoků: dATP, dGTP, dTTP, dCTP objem V0=0,5 μℓ, takže celkový objem bude 4*0,5 μℓ a tento objem doplním na požadovaný objem 100 μℓ (0,1 mℓ) destilovanou vodou.
1. TEGLU - roztok A (pro izolace plazmidů)
25 mM Tris-HCl (pH 8,0)
10 mM EDTA (pH 8,0)
50 mM glukóza (Mr = 180,16)
Popište jak byste připravili 10 ml TEGLU pufru z těchto složek:
1M Tris-HCl (pH 8,0)
0,5M EDTA (pH 8,0)
0,5M glukóza